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Demonstrationsexperiment auf Video

Trennung eines lipophilen Farbstoffgemisches durch Dünnschichtchromatographie (DC)

Lernziele: Chromatographische Methode, lipophile Farbstoffe

Peter Keusch




English version





Chemikalien:
Probelösung:  Farbstoffgemisch (Buttergelb, Sudanblau II, Sudanrot G und Indophenol in Toluol.
Vergleichslösungen:  Sudanrot G und Sudanblau II jeweils gelöst in Toluol.
Laufmittel:  Toluol

Glasgeräte und Material:
Trennkammer  (Marmeladenglas mit Schraubdeckel  h = 11 cm, d = 5 cm )
DC-Folie mit Trennschicht POLYGRAM® ALOX N/UV254  (Macherey Nagel)
3 Glaskapillaren (1 µL)


Gefahren und Sicherheitsmaßnahmen:

Toluol ist leichtentzündlich. Gesundheitsschädlich beim Einatmen. Reizt die Augen, Atmungsorgane und die Haut. Wird über die Haut aufgenommen. Aufnahme grösserer Mengen führt zu Rausch, Krämpfen bis zur Bewusstlosigkeit.

Schutzbrille und Schutzhandschuhe erforderlich. Das Experiment ist in einem Tischabzug durchzuführen!


Versuchsdurchführung:

Vor Versuchsbeginn wird auf der Polygramfolie eine Startlinie (etwa 1 cm vom unteren Rand) vorsichtig mit einem weichen Bleistift gezogen. Die Stellen an denen die zu untersuchenden Lösungen aufgetragen werden sollen, werden nummeriert. Dabei sind die Startpunkte 1 und 3 für die Vergleichssubstanzen und der Startpunkt 2 für das Farbstoffgemisch vorgesehen. Nun trägt man die verschiedenen Lösungen (jeweils 1 µl) je mit einer Glaskapillare punktförmig auf. Die Auftragskapillaren füllen sich bei organischen Lösungen beim Eintauchen sehr schnell von selbst. Vor Entleerung der Kapillare rollt man das eingetauchte Ende horizontal auf Filtrierpapier ab. Anschließend wird die Kapillare mit dem nicht benetzten Ende vorsichtig auf die Folie gesetzt. Die Trennschicht darf keinesfalls verletzt werden. Zur Erleichterung des Auftragens empfiehlt sich der Einsatz einer Auftragschablone.

Nachdem das Lösungsmittel auf der Folie verdunstet ist (ca. 10 min), stellt man die DC-Folie vorsichtig in eine mit Toluol beschickte Trennkammer und verschließt diese. Der Flüssigkeitsspiegel darf die Linie längs derer die Proben aufgetragen wurden keinesfalls übersteigen. Nach dem die Trennung beendet ist, wird die Folie aus der Trennkammer entnommen. Man markiert die Laufmittelfront und lässt das Laufmittel unter dem Abzug abdunsten.


Versuchsergebnis:


   

Videoclip
(Download RealPlayer .rm-Datei)


Das Farbstoffgemisch ist in eine seiner Komponenten entsprechende Zahl von farbigen Flecken aufgetrennt worden. Anhand der eingesetzten Referenzlösungen lassen sich Sudanrot G und Sudanblau II im Testgemisch identifizieren.
















Hintergrund:

Die qualitative Auswertung eines Dünnschichtchromatogramms erfolgt in der Regel direkt auf der DC-Platte über die für die mit einem bestimmten Laufmittel erzielten charakteristischen Rf -Werte.

Der Rf -Wert (Retentionsfaktor) wird wie folgt definiert:



Um reproduzierbare Rf -Werte zu erhalten bedarf es einer ausreichenden Kammersättigung und einer konstanten Zusammensetzung des Laufmittels. Auch die äusseren Bedingungen (z.B. Temperatur) dürfen keinen Schwankungen unterliegen.


Hinweise:
  Demonstrationsexperiment auf Video   Trennung eines Gemisches von Lebensmittelfarbstoffen durch Dünnschichtchromatographie (DC)
  Demonstrationsexperiment auf Video   Trennung der Blattfarbstoffe durch Dünnschichtchromatographie (DC)
  Demonstrationsexperiment auf Video   Trennung der Blattfarbstoffe durch Säulenchromatographie (SC)

Literatur:
Dünnschicht-Chromatographie mit TLC Micro-Sets, Machery-Nagel


Liste der Experimente






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